Aplicaciones de citometría de flujo en medicina de animales de compañía

Tenga en cuenta que el tipo de tubo puede variar entre diferentes muestras. Una muestra de sangre total en casos de sospecha de leucemia, aspirados de líquido abdominal en casos que presentan ascitis y aspirados de líquido pleural en casos que presentan derrame pleural se envían en un tubo de tapa morada (TTM) con EDTA. Una muestra de células obtenida con líquido pleural en un TTM es apropiada para los casos que presentan derrame pleural, y una muestra de células obtenida con una aguja de calibre 211 de una masa abdominal o torácica se agrega a un TTB junto con solución salina y suero del paciente.^2,6

Una vez que la muestra que contiene células vivas llega al laboratorio de citometría de flujo, se separa en pozos. La posibilidad de un diagnóstico preciso disminuye si las células han muerto, ya sea debido a un manejo brusco, una mala preparación de la muestra o la fragilidad celular asociada con los aspirados de animales que reciben medicación con esteroides. A continuación, se añaden a la muestra en cada pozo anticuerpos marcados con fluorocromo, los cuales se unen a antígenos intracelulares o de la superficie celular específicos.² Luego, cada muestra teñida se pasa a través de un tubo y se realiza el enfoque hidrodinámico. Con el enfoque hidrodinámico, las células teñidas fluyen a través de un tubo, 1 célula a la vez.² Cada célula se golpea con un rayo láser y se utiliza una óptica para medir la dispersión creada cuando el láser golpea los complejos antígeno-anticuerpo marcados con fluorocromo. La óptica se comunica con un programa informático que genera una impresión de diagnóstico. La impresión es interpretada por un patólogo clínico veterinario capacitado, quien genera un informe de diagnóstico que indica si la muestra fue identificada como neoplásica o inflamatoria. Si el diagnóstico es neoplasia, el patólogo clínico puede determinar el tipo de cáncer o el subtipo de linfoma7 mediante la evaluación de los tipos de marcadores en las células.⁷ Se pueden identificar distintos tipos de linfoma. Por ejemplo, una expresión elevada de CD21 en la superficie celular de los linfocitos es indicativa de linfomas de células B. Una vez que se identifica el tipo, un oncólogo puede determinar el pronóstico del paciente y la probabilidad de una respuesta beneficiosa a la quimioterapia.

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